多重免疫组化/多色免疫荧光是在同一张组织切片上标记多种标志物,来观察不同标志物的共定位和不同表型细胞空间分布的技术(定性、定量、定位)。
只要是用到组织切片,客户关注不同类型细胞的地方都可以用。目前这个技术目前主要用于肿瘤免疫领域,因为它是伴随着肿瘤免疫治疗发展起来的一个新技术。同时,在其他一些领域比如神经系统疾病、感染性疾病、罕见病(节约样本)、脂肪肝、糖尿病等领域也有使用。
主要是在一张切片上同时标记多个生物标志物,这样就可以定义很多不同的细胞表型,原位呈现不同表型细胞的位置和相互关系(1 共定位细胞亚型;2 不同细胞的空间关系)。
目前比较成熟的方法是TSA(酪胺信号放大)技术,详细的技术细节可以请我们技术支持来跟老师解答。
解除一抗种属限制,可以随意选择一抗种属,只要有对应HRP偶联二抗就行;信号放大10-1000倍。
石蜡包埋的组织,石蜡包埋好的细胞和TMA组织芯片。冰冻切片不做。
我们不接此类样本业务,只接石蜡包埋的组织切片、石蜡包埋好的细胞和TMA组织芯片。石蜡样本可以切的很薄,不容易脱片,比较容易形成单层细胞,如果切的过厚,不同层的标记重叠可能造成假阳性。
对于抗体没有什么特殊要求,用于免疫组化的抗体(IHC-P)即可,最好单克隆。流式、WB抗体需要进行测试才知道是否可行。
样本没有特殊要求,切片厚度2-5微米,7um也没事,但制片时最好用防脱载玻片,因为多重免疫组化流程比较复杂,容易出现脱片。制片后不要烤片直接晾干就行。50um切片太厚,不接此类样本。
邮寄/闪送(不受区域限制)或者销售自取都可以。全国样本都能接收。
片子要避光打包好,加入冰袋,加入减震物料,避免颠簸晃荡损坏样本;如果有抗体一起寄出,需要足量冰袋或干冰,尤其夏天或温度较高地区需要干冰运输,防止抗体降解失效。
实验周期是从抗体测试完成开始计算。7色需要3~6周,6色需要3~4周,5色需要2~4周,4色需要2~3周,3色需要小于一周,2色需要3天。基于我们丰富的经验,抗体测试时间会很快。因为多色实验影响因素很多,预实验会占据大部分的时间,需要多轮测试才能得到理想的结果。预实验通过后才会开启正式试验。
各个抗体的使用条件,染色顺序、染料搭配、抗原修复条件等,一个成熟稳定的方案往往需要多次测试才能成功。
所以我们建议客户用我们的商业化免疫探索包,节约时间,跳过预实验阶段;另外我们合作伙伴公开发表过文章的方法可以直接应用,无需预实验。
可以,我们根据老师提供的图像进行数据分析。
可以,我们的试剂盒具备IVD一类证,在2022年国内第一个的拿到,并且有完整质控体系保证。
4色及以上我们都有相应的成品试剂盒。如果是4色以下,直接建议客户在原料的周边试剂中一支支去挑,如果再打包成试剂盒价格会更贵些。
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