mIHC

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多重免疫组化mIHC

多重免疫组化技术(mIHC)近两年发展迅速,已经展示出强大的临床转化能力,解决了在同一张切片上进行多种生物标志物检测及共定位的难题。

mIHC在一张组织样本上复染多种分子标记,将多元信息呈现在同一画面内,配合特定软件进行全面分析,原位评估免疫细胞表型,获得各靶标数量、密度、百分比等数据,探寻组织微环境中的目标分子或不同类群细胞间的相互关系。这对于研究疾病的发生发展转移机制,探讨疾病诊断和治疗具有重要意义。

信号提高10-1000倍
优越的分辨率表现
一抗使用量更少
 减少曝光时间
共价结合,更利于多个标记
提高特异性,减少背景噪音

技术原理

Principle

TSA技术(Tyramide Signal Amplification,酪胺信号放大)利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白进行高密度原位标记,提高检测的灵敏度,大幅提高信噪比。TSA信号不受微波法影响,并能在抗体去除后保留信号,同时由于共价键结合方式,荧光探针结合稳定。在微波法处理后,即可进行下一轮染色检测,无需担心上一轮染色中抗体的干扰。因此,TSA技术可以使用同一种属来源的一抗进行多色标记,每一轮染色换用不同荧光标记,对组织切片样本多重染色。

技术优势

Advantages

特异性强

免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性

灵敏度高

在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等灵敏度不高的技术,当时抗体只能稀释几倍至几十倍;现在由于TSA信号放大功能,利用少量抗体仍可在细胞中与抗原结合,超高灵敏度的抗原抗体反应使得多重免疫组化方法越来越多的应用到病理诊断工作中

定位准确、形态与功能相结合

该技术通过抗原抗体反应和呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学的深入研究具有十分重要的意义

灵活性强

同一组织可选用多种不同组合的生物标志物,为临床研究提供多种选择方案

技术流程

Process

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